解析不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶的方法

大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液，少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中，因些，可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。

1.有机溶剂提取法

一些和脂质结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的蛋白质和酶，不溶于水、稀盐溶液、稀酸或稀碱中，可用乙醇、丙酮和丁醇等有机溶剂，它们具的一定的亲水性，还有较强的亲脂性、是理想的提脂蛋白的提取液。但必须在低温下操作。丁醇提取法对提取一些与脂质结合紧密的蛋白质和酶特别*，一是因为丁醇亲脂性强，特别是溶解磷脂的能力强；二是丁醇兼具亲水性，在溶解度范围内（度为10%，40度为6.6%）不会引起酶的变性失活。另外，丁醇提取法的pH及温度选择范围较广，也适用于动植物及微生物材料。

2.水溶液提取法

稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质zui常用的溶剂，通常用量是原材料体积的1-5倍，提取时需要均匀的搅拌，以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效成份性质而定。一方面，多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大，因此，温度高利于溶解，缩短提取时间。但另一方面，温度升高会使蛋白质变性失活，因此，基于这一点考虑提取蛋白质和酶时一般采用低温（5度以下）操作。为了避免蛋白质提以过程中的降解，可加入蛋白水解酶抑制剂（如二异丙基氟磷酸，碘乙酸等）。

下面着重讨论提取液的pH值和盐浓度的选择。

1、pH值
蛋白质，酶是具有等电点的两性电解质，提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH 范围内。用稀酸或稀碱提取时，应防止过酸或过碱而引起蛋白质可解离基团发生变化，从而导致蛋白质构象的不可逆变化，一般来说，碱性蛋白质用偏酸性的提取液提取，而酸性蛋白质用偏碱性的提取液。

2、盐浓度
稀浓度可促进蛋白质的溶，称为盐溶作用。同时稀盐溶液因盐离子与蛋白质部分结合，具有保护蛋白质不易变性的优点，因此在提取液中加入少量NaCl等中性盐，一般以0.15摩尔。升浓度为宜。缓冲液常采用0.02-0.05M磷酸盐和碳酸盐等渗盐溶液。

Anti-phospho-ERK1(pThr202/pThr204)+phospho ERK2(pThr183/pTyr185)/FITC  荧光素标记抗人、大、小鼠磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-phospho-ERK1(Thr197/Thr202) /FITC  荧光素标记磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-phospho-CaMK2a (pThr286)/FITC  荧光素标记抗磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-phospho-CaMK2a(pTyr231) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠等磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-phospho-ATF2(pSer490/pSer498)/FITC  荧光素标记抗磷酸化活化复制因子2抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-phospho APP(pThr668)/FITC  荧光素标记抗磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-phospho-P53(pSer392)/FITC  荧光素标记抗磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-phosphor-PAK1+PAK2+PAK3 (pSer141)/FITC  荧光素标记抗磷酸化p21激活激酶1/2/3抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-phospho-PAK1/2/3(pThr423)/FITC  荧光素标记抗磷酸化p21激活激酶1/2/3抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-phospho-PAK1(pSer144)/FITC  荧光素标记抗磷酸化p21激活激酶1抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml