1、称体重
2、培养基腹腔内注射本巴比妥钠50mg/kg将大鼠处死,用酒精严格消毒大鼠下颌至全腹皮肤及鼠毛,剪开下颌至中腹部皮肤,打开腹腔,推开肝脏并分离出肝及膈肌间的下腔静脉并给予切开放血。
3、肺血管灌洗:分离并部分横断切开气管,插入连接有10ml注射器的灌洗管并用细线加以固定,在固定的离心段剪断气管,剪开肋骨并打开胸腔将肺和心脏提出胸腔。用20号针(另一端连接20ml的注射器)穿刺进入右心室并顺着右心室插入到肺动脉进行肺血管的灌洗。直至左心房流出清亮液体,将肺和心脏、气管一起取下,灌洗成功的肺呈苍白色。
4、肺印片:革兰氏染色、改良GMS染色,
5、支气管灌洗:培养基通过注射器行支气管肺泡灌洗,每次灌洗10ml,连续7~8次,回收40~50ml支气管肺泡灌洗液。将BALFs离心30min(2000r/m),弃上清再混匀沉淀物,加入DMEM移入培养瓶中培养。
6、取不同断面的肺组织,甲醛固定,留作切片。
7、胰酶消化:经气管注入胰酶15ml,37度水浴,消化20分钟,间隔10min补加胰酶10ml.。将肺在2ml DNase中剪碎,摇床重震荡5-10分钟,100目————200目过滤,用显微镜观察消化情况,加5ml 血清中止消化,4度,1000r/ml离心10分钟,3mlDMEM悬浮细胞。Percoll梯度离心,DMEM洗,培养。
用于弯曲杆菌增菌肉汤和布氏琼脂制备(SN标准) Brucella Broth 布氏肉汤 250
用于空肠弯曲菌的分离培养基培养(SN 、GB标准) Skirrow Agar Base,Modified 改良Skirrow氏琼脂基础 250
用于弯曲杆菌选择性分离培养(GB标准) Camp-BAP Agar Base,Modified 改良Camp-BAP氏琼脂基础 250
用于弯曲杆菌的TTC试验(GB标准) TTC Agar Base TTC 琼脂基础 250
用于弯曲杆菌甘氨酸耐受性试验(GB标准) Glycine Medium 甘氨酸培养基 250
用于弯曲杆菌的硫化氢试验(GB标准) H2S Test Medium 快速硫化氢试验琼脂 250
用于弯曲杆菌的DNA酶水解试验(GB标准) Dnase Agar Base with Methyl Green DNA酶甲基绿琼脂基础 100
用于弯曲杆菌的马尿酸钠水解试验(GB标准) 马尿酸钠培养基 100
用于弯曲杆菌的硫化氢试验(GB标准) 快速硫化氢(H2S)试验琼脂 250
用于弯曲杆菌选择性增菌培养培养基(Merck方法) Bolton Selective Enrichment broth 波尔顿选择性增菌肉汤 250
用于弯曲杆菌分离培养(WHO方法) CCDA Base CCDA基础 250
每支添加于200mlCCDA基础中 CCDA Supplement CCDA添加剂 2ml*10支
用于弯曲杆菌分离培养(FDA方法) Campy-Cefex Agar Base Campy-Cefex 琼脂基础 250
每支添加于200ml Campy-Cefex 琼脂基础中 Campy-Cefex Supplement Campy-Cefex 添加剂 2ml*10
用于蜡样芽孢杆菌的固体平板计数(GB.SN标准) Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base 甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础(MYP) 250
用于蜡样芽孢杆菌的MPN值测定 (SN标准) Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础 250
用于蜡样芽孢杆菌的V-P试验(SN标准) V-P Medium,Modified 改良V-P培养基 250
用于蜡样芽孢杆菌的溶血测试验(SN标准) Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base 胰酪胨大豆羊血琼脂基础 250
用于蜡样芽孢杆菌的酪蛋白分解试验 培养基(GB标准) Casein Agar 酪蛋白琼脂 250
用于蜡样芽孢杆菌葡萄糖分解试验(SN标准) Phenol Red Dextrose Broth 酚红葡萄糖肉汤 250