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简述牛雌二醇ELISA 试剂盒内容及配制

点击次数:949 更新时间:2012-08-09
 

简述牛雌二醇ELISA 试剂盒内容及配制

试验原理:

Estradiol试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA.已知Estradiol浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Estradiol和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物AB,和酶结合物同时作用。产生颜色。Estradiol的浓度呈比例关系。

牛雌二醇ELISA 试剂盒

颜色的深浅和样品中

 

 

试剂盒内容及其配制:

 

试剂盒成份

96孔配置

48孔配置

96/48人份酶标板

1块板(96T

半块(48T

塑料膜板盖

1

半块

标准品:400pmol/L

1瓶(1.0ml

1瓶(0.5ml

空白对照

1瓶(1.0ml

1瓶(0.5ml

标准品稀释缓冲液

1瓶(8.0ml

1瓶(4.0ml

生物素标记的抗Estradiol抗体

1瓶(8.0ml

1瓶(4.0ml

亲和链酶素-HRP

1瓶(12ml

1瓶(6.0ml

洗涤缓冲液

1瓶(20ml

1瓶(10ml

底物A

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

底物B

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

终止液

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

 

 

自备材料:

 

 

 

1. 蒸馏水。

 

 

2. 加样器:5ul10ul50ul100ul200500ul1000ul

3. 振荡器及磁力搅拌器等。

 

4. 

安全性:

 

 

 

1. 避免直接接触终止液和底物AB。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。牛雌二醇ELISA 试剂盒

 

2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

 

 

试剂的准备:

 

 

 

1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:

 

 

400

 pmol/L

6号标准品)

原倍浓度不用稀释直接加入50ul

200 

pmol/L

5号标准品)

100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液

100 

pmol/L

4号标准品)

100ul5号标准品加入100ul的标准品稀释液

50 

pmol/L

3号标准品)

100ul4号标准品加入100ul的标准品稀释液

25

pmol/L

2号标准品)

100ul3号标准品加入100ul的标准品稀释液

12.5 pmol/L

1号标准品)

100ul2号标准品加入100ul的标准品稀释液

0 pmol/L

(空白对照)

原始浓度不用稀释直接加入50ul

 

 

2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。

 

 

 

试剂盒性能:

 

 

 

 

1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990

 

 

2. 特异性:不与其它细胞因子反应。牛雌二醇ELISA 试剂盒

3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%

 
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