产品名称:尼氏单孢子虫PCR检测试剂盒说明书 英文名称:Haplosporidium nelsoniPCR 编号:HE31061-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 氢氧化铯/氢氧化铯一合物/Cesium hydroxide monohydrate 包装;500g 1,1,2,2-四溴乙烷/对称四溴乙烷/对称四溴化乙炔/四溴化乙炔/四溴乙烷/均四溴乙烷/四溴乙烷ZC-4/Acetylene tetrabromide 包装;5g 3,5-二氯杨酸/3,5-二氯邻羟基苯甲酸/3,5-二氯邻羟基苯甲酸/3,5-Dichlorosalicylic acid 包装;25g 对苯醌/2,5-环己二烯-1,4-二酮/苯醌/对苯二酮/对醌/1,4-苯醌/1,4-苯二酮/p-Benzoquinone 包装;5g β-巯基乙胺/半胱胺/巯乙胺/巯基乙胺/2-氨基乙硫醇/2-巯基乙胺/硫化乙醇胺/2-氨基乙硫/Cysteamine 包装;5MG β-巯基乙胺盐酸盐/2-氨基乙硫醇盐酸盐/半胱胺盐酸盐/盐酸半胱氨/Cysteamine hydrochloride 包装;10mg 代硫代乙酰胆碱/2-(乙酰硫代)-N,N,N-*基乙铵化物/化硫代乙酰胆碱/化乙酰硫代胆碱/化-S-乙酰硫代胆碱/乙酸-N-(2-巯基乙基)*基化铵/S-乙酰硫代胆碱化物/Acetylthiocholine iodide 包装;25ml 亚硝基二乙基胺/N-亚硝基二乙胺/N-二乙基亚硝胺/N-亚硝基二乙基胺/二乙基亚硝胺/N-Nitrosodiethylamine 包装;50ml 海柯皂苷元/海柯吉宁/海柯皂甙元/(25R)-5α-螺甾(烷)-3β-醇-12-酮/(3β,5α,25R)-3-羟基螺甾(烷)-12-酮/海可吉宁/番麻皂素/Hecogenin 包装;100g 正十二硫醇/正十二硫醇/月桂硫醇/正十二烷硫醇/1-十二硫醇/1-巯基代十二烷/十二烷基硫醇/正十二烷基硫醇/十二碳烷硫醇/月桂二醇/1-十二烷基硫醇/十二硫醇/1-Dodecanethiol 包装;25g 乙酸桂酯/乙酸 3-苯基烯丙酯/N-肉桂酰-N-苯基羟胺/醋酸桂酯/醋酸肉桂酯/肉桂醇乙酸酯/3-苯基-2--1-醇乙酸酯/3-苯基-2-丙炔乙酯/Cinnamyl acetate 包装;25g 2 4 6-三磺酸/三磺酸/苦基磺酸/TNBS 包装;5g 聚酸/2-酸均聚物/酸类树脂涂料/酸树脂/酸单体聚合物/酸改性树脂/酸树脂乳液/聚羧乙烯/卡波沫/卡波姆树脂/Poly(acrylic acid) 包装;100g 1,3-二羟基萘/1,3-萘二酚/萘间二酚/间萘二酚/间二萘酚/1,3-Dihydroxynaphthalene 包装;25g 硫代乳酸/β-巯基丙酸/硫代丙醇酸/巯基丙酸/3-巯基丙酸/β-硫代丙醇酸/β-硫氢基丙酸/3-硫代乳酸/3-Mercaptopropionic acid 包装;1g 六氟异丙醇/1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇/1,1,1,3,3,3-六氟代-2-丙醇/1,1,1,3,3,3-六氟异丙醇/HFIP 包装;250mg 三氯化/Iodine trichloride 包装;100g 尼氏单孢子虫PCR检测试剂盒说明书Achromobacter│ruhlandii 中文名称:拉氏无色杆菌种属:Achromobacter│ruhlandii分离基物:样/污油处理池污提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:有机污染物降解菌/石油,柴油等烷烃类物质降解菌培养方法培养基:33生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99% Kluyvera│georgiana 中文名称:佐治亚克吕沃尔氏菌种属:Kluyvera│georgiana分离基物:生物样/野生鲻鱼肠道内容物提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:共生微生物/野生鲻鱼肠道共生菌培养方法培养基:33生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99% Zobellella│denitrificans 中文名称:脱氮卓贝尔氏菌种属:Zobellella│denitrificans分离基物:沉积物/沉积物提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:471生长条件:30-35℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99% Bowmanella│denitrificans 中文名称:脱氮鲍曼氏菌种属:Bowmanella│denitrificans分离基物:样/表层海提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:471生长条件:30-35℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99% Shewanella│baltica 中文名称:波罗的海希瓦氏菌种属:Shewanella│baltica分离基物:生物样/比目鱼肠道内容物提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:共生微生物/比目鱼肠道共生菌 产酶微生物/蛋白酶培养方法培养基:33生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99% Corynebacterium│variabile 中文名称:变异棒杆菌种属:Corynebacterium│variabile分离基物:生物样/比目鱼肠道内容物提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:共生微生物/比目鱼肠道共生菌 产酶微生物/脂酶(三丁酸甘油酯)培养方法培养基:33生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:95% Bacillus│hwajinpoensis 中文名称:花津浦芽孢杆菌种属:Bacillus│hwajinpoensis分离基物:生物样/野生鲻鱼肠道内容物提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:共生微生物/野生鲻鱼肠道共生菌培养方法培养基:33生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:95% Bacillus│xiamenensis 中文名称:厦门芽胞杆菌种属:Bacillus│xiamenensis分离基物:生物样/野生鲻鱼肠道内容物提供形式:冻干物模式菌株:yes应用领域:模式菌株:;共生微生物/野生鲻鱼肠道共生菌;产酶微生物/淀粉酶、蛋白酶、脂酶(三丁酸甘油酯);已测全基因组草图(赖)培养方法培养基:33生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:≥99% |